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ELISA試劑盒進口大鼠的即陽性判定值法和抑制率法
更新時間:2017-11-13   點擊次數(shù):1138次

ELISA試劑盒進口大鼠條件許可下,應該用比色計測定吸光值,這樣可以得到客觀的數(shù)據(jù)。先讀出標本(sample,S)、陽性對照(P)、和陰性對照(N)的吸光值,然后進行計算。計算方法有多種,大致可分為陽性判定值法和標本與陰性對照比值法兩類。
 間接法和夾心法
     這類反應的定性結(jié)果可以用肉眼判斷。目視標本也無色或近于無色者判為陰性,顯色清晰者為陽性。但在ELSIA檢測試劑盒中,正常人血清反應后??沙霈F(xiàn)呈色的本底,此本底的深淺因試劑的組成和實驗的條件不同而異,因此實驗中必須加測陰性對照。陰性對照的組成應為不含受檢物的正常血清或類似物(見3.6)。在用肉眼判斷結(jié)果時,更宜用顯色深于陰性對照作為標本陽性的指標。
a. 陽性判定值
陽性判定值(cut-off value)一般為陰性對照A值加上一個特定的常數(shù),以此作為判斷結(jié)果陽性或陰性的標準。
    用此法判斷結(jié)果要求實驗條件十分恒定,試劑的制備必須標準化,陽性和陰性的對照品應符合一定的規(guī)格,須配用精密的儀器,并嚴格按規(guī)定操作。陽性判定值公式中的常數(shù)是在這特定的系統(tǒng)中通過對大量標本的實驗檢測而得到的?,F(xiàn)舉某種檢測HBsAg的試劑盒為例。試劑盒中的陰性對照品為不含HBsAg的復鈣人血漿,陽性對照品HBsAg的含量標明為P=9±2ng/ml.每次試驗設(shè)2個陽性對照和3個陰性對照。測得A值后,先計算陰性對照A值的平均數(shù)(NCX)和陽性對照A值的平均數(shù)(PCX),兩個平均數(shù)的差(P-N)必須大于一個特定的數(shù)值(例0.400),試驗才有效。3個陰性對照A值均應≥0.5×NCX,并≤1.5×NCX,如其中之一超出此范圍,則棄去,而已另兩個陰性對照重新計算NCX;如有兩個陰性對照A值超出以上范圍,則該次實驗無效。陽性判定值按下式計算: 陽性判定值=NCX+0.05 標本A值>陽性判定值的為陽性,小于陽性判定值的為陰性。應注意的是,式中0.05為該試劑盒的常數(shù),只適合于該特定條件下,而不是對各種試劑均可通用。
    根據(jù)以上敘述可以看出,在這種方法中陰性對照和陽性對照也起到試驗的質(zhì)控作用,試劑變質(zhì)和操作不當均會產(chǎn)生"試驗無效"的后果。
b.標本/陰性對照比值
在實驗條件(包括試劑)較難保證恒定的情況下,這種判斷法較為合適。在得出標本(S)和陰性對照(N)的A值后,計算S/N值。也有寫作P/N的,這里的P不代表陽性(positive),而是病人(patient)的縮寫,不應誤解。為避免混淆,ELISA試劑盒進口大鼠更宜用S/N表示。在早期的間接法ELSIA檢測試劑盒中,有些作者定出S/N為陽性標準,現(xiàn)多為各種測定所沿用。實際上每一測定系統(tǒng)應該用實驗求出各自的S/N的閾值。更應注意的是,N所代表的陰性對照是不含受檢物質(zhì)的人血清。有的試劑盒中所設(shè)陰性對照為不含蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)含量較底的緩沖液,以致反應后產(chǎn)生的本底可能較正常人血清的本底低得多。因此,這類試劑盒規(guī),如N<0.05(或其他數(shù)值),則按0.05計算,否則將出現(xiàn)假陽性結(jié)果。
3 strips        25038-59-9     聚對苯二甲酸乙二酯標準品
3 strips    Positive Bioreaction        生物活性測定陽性對照標準品
2ml×2amplues    Dicyclohexyl    92-51-3    二環(huán)己基標準品
2ml    Glycerin     56-81-5     甘油標準品
2ml    Anethole (AS)    4180-23-8    茴香腦標準品
2ml    Bis(2-ethylhexyl)maleate    142-16-5    馬來酸二乙基己酯標準品
2ml    Methyl Salicylate (AS)    119-36-8     水楊酸甲酯標準品
2ml            鯡魚油標準品
2mg            戈舍瑞林雜質(zhì)標準品
2g    Bismuth Subgallate (AS)    99-26-3    堿式?jīng)]食子酸鉍標準品
2g    Polysorbate 60 (AS)    9005-67-8     聚山梨醇酯60標準品
2g    Polysorbate 40 (AS)    9005-66-7     聚山梨醇酯40標準品
2g    Polysorbate 80     9005-65-6     聚山梨醇酯80標準品
ELISA試劑盒進口大鼠

 

 

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